TFA (trifluoroacetato)

También: ácido trifluoroacético · trifluoroacetic acid · sal de TFA · contraión TFA

Ácido fuerte usado para separar el péptido de la resina y como aditivo de la fase móvil en HPLC; queda en el producto como contraión salvo que se intercambie por acetato o cloruro.

El ácido trifluoroacético (CF3COOH, 114,0 g/mol) aparece dos veces en la fabricación de un péptido. Al final de la síntesis en fase sólida, una mezcla con TFA concentrado rompe el enlace con la resina y retira los grupos protectores. Después, en la purificación por HPLC de fase reversa, se añade al 0,1 % a la fase móvil como agente de par iónico para que los picos salgan estrechos y simétricos.

Como la fracción purificada se liofiliza directamente, el péptido queda como sal de trifluoroacetato: cada carga positiva emparejada con un anión CF3COO⁻ de 113 g/mol, casi el doble que un acetato. Un péptido con cuatro residuos básicos puede arrastrar varios cientos de gramos por mol de TFA, una fracción de la masa del polvo que no es péptido y que un informe de contenido debe tratar aparte.

El TFA residual se cuantifica por cromatografía iónica o por resonancia magnética de flúor-19, no por el HPLC de pureza, que no lo ve. Se considera una impureza a controlar en material para cultivo celular, porque la literatura lo documenta como interferente en ensayos in vitro, y por eso los fabricantes ofrecen el intercambio a acetato o clorhidrato como paso adicional. Si el certificado no declara la forma salina, no se sabe cuál es.