Tiempo de retención

También: retention time · tR · tiempo de elución · RRT

Tiempo entre la inyección de la muestra y la salida de un compuesto de la columna cromatográfica; en condiciones fijas es característico del compuesto y sirve para reconocerlo.

En HPLC de fase reversa, la columna retiene más a las moléculas más hidrofóbicas, que salen más tarde. El tiempo de retención es el instante en que el vértice del pico llega al detector. Depende de la molécula y de todo el método: columna, composición y gradiente de la fase móvil, flujo y temperatura. Cambiar uno de esos parámetros cambia el tiempo, así que la cifra solo tiene sentido junto con el método.

Su uso analítico es la comparación con un patrón. Si el patrón de referencia del compuesto sale a los 12,3 minutos en ese método y la muestra da un pico a los 12,3, el tiempo apoya la identidad; si sale a los 14, algo es distinto. Es una evidencia de apoyo, no una confirmación: compuestos diferentes pueden coincidir en tiempo, y por eso se combina con la espectrometría de masas.

Las modificaciones estructurales se ven en el tiempo de retención. Un péptido lipidado como semaglutida o tirzepatida, que lleva una cadena de ácido graso, se retiene mucho más que la hormona sin lipidar; una secuencia truncada o una variante oxidada salen desplazadas respecto al pico principal. En los informes, las impurezas suelen nombrarse por su tiempo de retención relativo al del compuesto (RRT), no por su estructura.